Introduction : La colistine est un antibiotique polypeptidique de la famille des polymyxines et la gentamicine de la famille des aminosides. L’association de ces deux antibiotiques est utilisée dans le cadre d’une décontamination digestive sélective (DDS). L’objectif de ce travail est d’évaluer la stabilité de cette préparation afin de proposer une durée de validité et ainsi l’intégrer aux préparations hospitalières de l’AP-HM. Cette étude comprend une validation de la méthode de dosage pour la gentamicine (celle de la colistine étant déjà réalisée), ainsi qu’une dégradation forcée.

Matériel & méthode : L’automate utilisé pour cette étude par chromatographie liquide haute performance (CLHP) est l’ultimate DIONEX 3000 couplé au logiciel Chromeleon. La colonne utilisée est l’Aeris 3,6 m Widepore XB-C18 200 A° 250 x 4,6 mm. La phase mobile A est composée d’un mélange d’eau et d’acide trifluoroacétique à 0,1%, la phase mobile B d’un mélange d’acétonitrile et d’acide trifluoroacétique à 0,1%. Le débit est de 1,5 mL/min en mode gradient avec une longueur d’onde à 240 nm. La validation de la méthode de dosage de la gentamicine repose sur les recommandations de l’ICH Q2, R1, et comprend la linéarité, la répétabilité et la fidélité intermédiaire.

Résultats & discussion : Pour la linéarité, 7 dosages ont été réalisés par différents opérateurs à 7 concentrations : 0,0625–0,125–0,25–0,5–0,75–1,0–2,0 mg/mL. Pour la répétabilité, 1 opérateur a effectué sur le même automate 18 dosages pour les concentrations suivantes : 0,25-0,5-0,75 mg/mL. Pour la fidélité intermédiaire, tous les paramètres (expérimentateur, jour, appareil) ont varié pour le dosage aux concentrations : 0,25-0,5-0,75 mg/mL. Le coefficient de variation obtenu est inférieur à 5%. Une étude de dégradation forcée a été initiée et a pour but de dégrader environ 20% de la molécule dans des conditions de dégradation accélérée (lumière, chaleur, acidité, basicité et oxydation), et d’identifier les produits de dégradation. Les résultats obtenus apparaitront dans le poster. L’étude de stabilité consiste à réaliser sur des gélules de coli-genta stockées à 25°C/60%HR et à 40°C/75%HR aux temps suivants : T0-T1-T3-T6-T9-T12-T24 mois ; un dosage par CLHP de colistine et de gentamicine et de leurs produits de dégradation potentiels, un test de désagrégation et une mesure à l’awmètre. Un test de dissolution et un dénombrement microbien sont réalisés au T0 et T24 mois.

Conclusion : La méthode de dosage de la gentamicine par CLHP est validée comme indicatrice de stabilité. Celle de la colistine avait été préalablement validée. Les premiers résultats de l’étude de stabilité sont encourageants, une évaluation de l’activité antimicrobienne des principes actifs permettra de compléter cette étude pour proposer une durée de validité de cette préparation.

Mots-clefs : Préparations hospitalières, Antibiothérapie, Bonnes pratiques de préparation, Contrôles analytiques, Dossier pharmaceutique