Introduction : Le traitement des douleurs neuropathiques repose souvent sur des molécules systémiques à effets indésirables marqués. Les préparations topiques associant amitriptyline et lidocaïne offrent une alternative locale intéressante, bien que peu documentée en France. L’objectif est de développer et valider une méthode de dosage de ces deux molécules par électrophorèse capillaire (EC) selon les recommandations ICH Q2(R1) pour assurer la qualité d’une formulation dermique à base de Versatile®.

Matériel & méthode : Une méthode indicatrice de stabilité par EC Agilent 7100 a été menée selon les recommandations ICH Q2 R1. Les paramètres utilisés pour la méthode de dosage étaient : un capillaire de silice (50 µm x 35 cm), un voltage de +25kV, une température de 25°C et une détection UV avec λ=210 nm. Le tampon était composé de phosphate 25 mM pH 3.15, d’eau PPI et d´alcool isopropylique (50/30/20, v/v/v). La validation de la méthode a inclus une analyse de la spécificité, la linéarité, la fidélité, l’exactitude ainsi que les limites de détection et de quantification. La linéarité a été testée sur une gamme de 7 points allant de 1 à 50 µg/mL avec 3 niveaux de contrôles qualité à 7.5, 25 et 45µg/mL pour la répétabilité et la reproductibilité. L’étalon interne utilisé était la procaïne à 50 µg/mL. La spécificité a été évaluée par l’absence d´interférence dans les blancs et par une résolution >1.5 entre les deux analytes injectés simultanément. Une étude de dégradation forcée en milieux thermique (80°C 3H), acide (HCL 1M 3H), alcalin (NaOH 1M 3H) et oxydant (H202 3%, 3H, 24H) a été réalisée sur la lidocaïne, l’amitriptyline et la base dermique seule.

Résultats & discussion : Pour les deux analytes, la méthode est spécifique, linéaire (r² >0.99, n=7) et juste (erreur relative <3% sauf pour le point de gamme 1 où ER<10%). La fidélité a été démontré sur les 3 niveaux de CQ en analysant la répétabilité et la reproductibilité (respectivement CV <2% et CV<5% avec n=18). Pour l’amitriptyline et la lidocaïne, les limites de détection (LOD) s’élèvent respectivement à 0,18 et 0,55 µg/mL, tandis que les limites de quantification (LOQ) sont de 0,27 et 0,83 µg/mL. Aucun effet matrice n’a été retrouvé. L´étude de dégradation forcée révèle une thermosensibilité de l´amitriptyline (80°C 3H) et une forte vulnérabilité au stress oxydatif (H2O2) pour les deux molécules : l´amitriptyline présente une dégradation de 25% après 24h, tandis que la lidocaïne subit une dégradation de 52% dans les mêmes conditions, avec une dégradation complète à 72h pour les deux analytes.

Conclusion : La méthode analytique est validée selon les critères de l´ICH Q2(R1). Le dosage simultané de l’amitriptyline et de la lidocaïne peut être réalisé. Ce travail constitue un préalable à l´étude de stabilité physico-chimique à long terme de cette préparation topique.

Mots-clefs : Contrôles analytiques, Préparations magistrales, Stabilité médicamenteuse